Кнопка "ON-OFF"
- Эта кнопка включает и выключает прибор. После включения прибор готов к измерению в соответствии с параметрами последней калибровки ("STANDARD"или "USER"). На дисплее включенного прибора ― символ «00».
- Примечание: При внезапном выключении прибора (прекращение подачи электричества), дисплей при повторном включении кнопкой "ON-OFF" замигает. Это может повториться и на следующий день, однако это не связано с неисправностью прибора.
Кнопка "CHOICE OF CALIBRATION"
- Переключает калибровку "STANDARD" (установленную производителем) на "USER" (собственные параметры калибровки, установленные пользователем).
- Светодиод показывает выбранный режим.
- Если калибровка была произведена, на дисплее высвечивается символ «00».
- Если калибровка не проводилась, на дисплее высвечивается «--». Это возможно только у нового прибора в режиме "USER".
- Калибровка "STANDARD" производится производителем прибора перед отправкой.
- Собственную калибровку "USER" может произвести каждый пользователь и оба значения калибровки сохраняются в памяти прибора, пока не будут заново перекалиброваны.
Кнопка "CALIBRATION"
- С помощью этой кнопки проводится собственная калибровка "USER". Калибровку нужно проводить минимально тремя калибровочными растворами.
- При меньшем количестве калибровочных значений прибор считает калибровку не завершенной.
- До завершения калибровки на дисплее мигают последовательно предлагаемые величины для калибровки.
- Советуем – проводить калибровку в диапазоне, который перекрывает весь спектр диапазона проводимых измерений (провести калибровку следует как можно большим количеством пробирок с равномерно распределенными величинами оптической плотности по измеряемому диапазону).
- Микропроцессор прибора управляет процессом установки собственных калибровок "USER", которые сохраняются и после выключения прибора.
- На задней стороне прибора находятся два входа. Один вход для подключения к сетевому адаптеру, другой ― для соединения с компьютером (для калибровки"STANDARD"). Этот вход предназначен только для производителя.
Последовательность работы
- Для измерения лучше всего использовать пробирки, на которые был прибор калиброван в режиме "STANDARD" (кат. номер 50001530).
- Прибор позволяет использовать пробирки диаметра 15-18 мм (макс. 18,5 мм).
Калибровка
- Калибровка прибора необходима только при переходе на другой тип пробирок, чем те, которые поставляет ПЛИВА-Лахема Диагностика или при аннулировании калибровки. В данном случае выбирается режим "USER".
Пробирки для использования должны иметь следующие параметры:
- Декларированный изготовителем стандартный размер;
- Материал – стекло или прозрачная пластмасса;
- Диаметр – мин. 15 мм, макс. 18,5 мм (включая отклонения).
Подготовьте определенную концентрацию суспензии Escherichia coli, соответствующую как минимум трем выбранным величинам МакФарланда (напр. 0,5, 1,0, 3,0) согласно таблице:
| Стандарт МакФарланда | Коцентрация E. coli | Теоретическая оптическая плотность (OП) |
| 0,5 | 1,5 x 108 | 0,125 |
| 1,0 | 3,0 x 108 | 0,25 |
| 2,0 | 6,0 x 108 | 0,50 |
| 3,0 | 9,0 x 108 | 0,75 |
| 4,0 | 12,0 x 108 | 1,0 |
| 5,0 | 15,0 x 108 | 1,25 |
- Измерьте оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 540 мм и длине оптического пути 10 мм.
Последовательность калибровки
- Для ввода пользователем новой калибровки ― необходимо провести калибровку хотя бы по трем калибровочным точкам. Советуем соблюдать правила калибровки, указанные выше (описание кнопки "CALIBRATION").
- Подсоедините прибор к источнику питания.
- Включите прибор кнопкой "ON-OFF" на передней панели.
- Для начала калибровки – нажмите кнопку "CALIBRATION". На дисплее высвечивается значение 0,0 McF, что соответствует оптической плотности основного раствора (дистиллированная вода или физиологический раствор), используемого для приготовления бактериальной суспензии.
- Если пользователь не хочет использовать эту величину для калибровки, короткое нажатие кнопки "CALIBRATION" переводит к следующей калибровочной величине. Следующие величины для калибровки 0,5 McF, далее 1,0 McF, далее с шагом 1 McF до 15 McF. Предлагается 8 значений для калибровки, не считая 0 McF и 15 McF. Если пользователь пройдет 8 значений ― прибор предложит величину 15 McF, независимо от того, какое значение должно быть по очереди.
- Если пользователь вставит в прибор пробирку с калибровочным раствором соответствующим выбранной величине, прибор измерит мутность и присоединит ее к выбранной величине. В процессе измерения дисплей не высвечивает никаких данных. После измерения эта величина снова отобразится на дисплее и в случае, если калибровка проводилась менее чем по трем точкам, не мигает. После удаления пробирки, прибор предложит другую величину для калибровки.
- Продолжайте процесс с пункта б) до пункта в) до момента предложения последней калибровочной величины, которой является величина 15 McF, если пользователь не захочет завершить калибровку раньше.
- Калибровку можно завершить в любой момент, удерживая нажатую кнопку "CALIBRATION" до появления на дисплее символа «--» или "8.8." Если были измерены хотя бы три величины, калибровка считается действительной и будет произведен пересчет калибровочной кривой. Во время пересчета прибор показывает "8.8." После завершения пересчета и расчета новой калибровочной кривой, прибор вернется в режим измерения и на дисплее отобразится символ "00". Если не были измерены хотя бы три точки, на дисплее отобразится символ «--» и прибор вернется в режим измерения без изменения ранее установленной калибровки. Если проведено измерение трех образцов во время калибровки и пользователь хочет аннулировать калибровку, тогда необходимо нажать на кнопку "ON-OFF", которая выключит прибор.
Измерение
- Подсоедините прибор к источнику питания;
- Включите прибор с помощью кнопки "ON-OFF" на передней панели;
- С помощью кнопки "CHOICE OF CALIBRATION" выберите нужный Вам режим измерения "STANDARD" или "USER";
- Вставьте пробирку с бактериальной суспензией, которую хотите измерить и считайте значение на дисплее;
- Прибор выключите с помощью кнопки "ON-OFF" на передней панели.
- Предупреждение: минимальный объем суспензии для измерения в поставляемых пробирках составляет 2 мл.
- Конструкция прибора позволяет использовать пробирки только с круглым дном.
Приготовление стандарта мутности по McFarland (McF):
- приготовьте растворы: BaCl2 x 2H2O ― 1% и H2SO4 ― 1%;
- приготовьте пробирки с диаметром одинаковым с пробирками, которые используются для приготовления бактериальных суспензий;
- добавьте обозначенные в таблице 1 растворы в указанных количествах для получения общего объема 10 мл, осадок BaSO4 при встряхивании создает необходимую мутность для оценки бактериальных суспензий;
- тщательно закройте пробирки.
- Стабильность стандарта McF (сульфат бария) ― 6 месяцев при хранении в темном месте.
- Перед приготовлением бактериальной суспензии тщательно встряхните пробирки со стандартом McF для создания гомогенной мутности.
- Сравните визуально мутность бактериальной суспензии с мутностью предполагаемой пробирки стандарта McF (или ближайших по мутности пробирок, т.е. для приготовления бактериальной суспензии 6х108 микробных тел/мл, сравните их с пробирками McF номер 1, 2, 3 и т.д.).
Таблица
| Номер по шкале McF | Приблизительное количество Мт/мл | BaCl2 (мл) | H2SO4 (мл) |
| 0,5 | 1х108/мл | 0,05 | 9,95 |
| 1 | 3х108/мл | 0,1 | 9,9 |
| 2 | 6х108/мл | 0,2 | 9,8 |
| 3 | 9х108/мл | 0,3 | 9,7 |
| 4 | 12х108/мл | 0,4 | 9,6 |
| 5 | 15х108/мл | 0,5 | 9,5 |
| 6 | 18х108/мл | 0,6 | 9,4 |
| 7 | 21х108/мл | 0,7 | 9,3 |
| 8 | 24х108/мл | 0,8 | 9,2 |
| 9 | 27х108/мл | 0,9 | 9,1 |
| 10 | 30х108/мл | 1,0 | 9,0 |
