Кнопка "ON-OFF"
Эта кнопка включает и выключает прибор. После включения прибор готов к измерению в соответствии с параметрами последней калибровки ("STANDARD"или "USER"). На дисплее включенного прибора ― символ «00».
Примечание: При внезапном выключении прибора (прекращение подачи электричества), дисплей при повторном включении кнопкой "ON-OFF" замигает. Это может повториться и на следующий день, однако это не связано с неисправностью прибора.
Кнопка "CHOICE OF CALIBRATION"
Переключает калибровку "STANDARD" (установленную производителем) на "USER" (собственные параметры калибровки, установленные пользователем). Светодиод показывает выбранный режим. Если калибровка была произведена, на дисплее высвечивается символ «00». Если калибровка не проводилась, на дисплее высвечивается «--». Это возможно только у нового прибора в режиме "USER". Калибровка "STANDARD" производится производителем прибора перед отправкой. Собственную калибровку "USER" может произвести каждый пользователь и оба значения калибровки сохраняются в памяти прибора, пока не будут заново перекалиброваны.
Кнопка "CALIBRATION"
С помощью этой кнопки проводится собственная калибровка "USER". Калибровку нужно проводить минимально тремя калибровочными растворами. При меньшем количестве калибровочных значений прибор считает калибровку не завершенной. До завершения калибровки на дисплее мигают последовательно предлагаемые величины для калибровки.
Советуем – проводить калибровку в диапазоне, который перекрывает весь спектр диапазона проводимых измерений (провести калибровку следует как можно большим количеством пробирок с равномерно распределенными величинами оптической плотности по измеряемому диапазону).
Микропроцессор прибора управляет процессом установки собственных калибровок "USER", которые сохраняются и после выключения прибора.
На задней стороне прибора находятся два входа. Один вход для подключения к сетевому адаптеру, другой ― для соединения с компьютером (для калибровки"STANDARD"). Этот вход предназначен только для производителя.
Последовательность работы
Для измерения лучше всего использовать пробирки, на которые был прибор калиброван в режиме "STANDARD" (кат. номер 50001530). Прибор позволяет использовать пробирки диаметра 15-18 мм (макс. 18,5 мм).
Калибровка
Калибровка прибора необходима только при переходе на другой тип пробирок, чем те, которые поставляет ПЛИВА-Лахема Диагностика или при аннулировании калибровки. В данном случае выбирается режим "USER".
- Пробирки для использования должны иметь следующие параметры:
- Декларированный изготовителем стандартный размер;
- Материал – стекло или прозрачная пластмасса;
- Диаметр – мин. 15 мм, макс. 18,5 мм (включая отклонения).
- Подготовьте определенную концентрацию суспензии Escherichia coli, соответствующую как минимум трем выбранным величинам МакФарланда (напр. 0,5, 1,0, 3,0) согласно таблице:
| Стандарт МакФарланда | Коцентрация E. coli | Теоретическая оптическая плотность (OП) |
| 0,5 | 1,5 x 108 | 0,125 |
| 1,0 | 3,0 x 108 | 0,25 |
| 2,0 | 6,0 x 108 | 0,50 |
| 3,0 | 9,0 x 108 | 0,75 |
| 4,0 | 12,0 x 108 | 1,0 |
| 5,0 | 15,0 x 108 | 1,25 |
- Измерьте оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 540 мм и длине оптического пути 10 мм.
Последовательность калибровки
Для ввода пользователем новой калибровки ― необходимо провести калибровку хотя бы по трем калибровочным точкам. Советуем соблюдать правила калибровки, указанные выше (описание кнопки "CALIBRATION").
- Подсоедините прибор к источнику питания.
- Включите прибор кнопкой "ON-OFF" на передней панели.
- Для начала калибровки – нажмите кнопку "CALIBRATION". На дисплее высвечивается значение 0,0 McF, что соответствует оптической плотности основного раствора (дистиллированная вода или физиологический раствор), используемого для приготовления бактериальной суспензии.
- Если пользователь не хочет использовать эту величину для калибровки, короткое нажатие кнопки "CALIBRATION" переводит к следующей калибровочной величине. Следующие величины для калибровки 0,5 McF, далее 1,0 McF, далее с шагом 1 McF до 15 McF. Предлагается 8 значений для калибровки, не считая 0 McF и 15 McF. Если пользователь пройдет 8 значений ― прибор предложит величину 15 McF, независимо от того, какое значение должно быть по очереди.
- Если пользователь вставит в прибор пробирку с калибровочным раствором соответствующим выбранной величине, прибор измерит мутность и присоединит ее к выбранной величине. В процессе измерения дисплей не высвечивает никаких данных. После измерения эта величина снова отобразится на дисплее и в случае, если калибровка проводилась менее чем по трем точкам, не мигает. После удаления пробирки, прибор предложит другую величину для калибровки.
- Продолжайте процесс с пункта б) до пункта в) до момента предложения последней калибровочной величины, которой является величина 15 McF, если пользователь не захочет завершить калибровку раньше.
- Калибровку можно завершить в любой момент, удерживая нажатую кнопку "CALIBRATION" до появления на дисплее символа «--» или "8.8." Если были измерены хотя бы три величины, калибровка считается действительной и будет произведен пересчет калибровочной кривой. Во время пересчета прибор показывает "8.8." После завершения пересчета и расчета новой калибровочной кривой, прибор вернется в режим измерения и на дисплее отобразится символ "00". Если не были измерены хотя бы три точки, на дисплее отобразится символ «--» и прибор вернется в режим измерения без изменения ранее установленной калибровки. Если проведено измерение трех образцов во время калибровки и пользователь хочет аннулировать калибровку, тогда необходимо нажать на кнопку "ON-OFF", которая выключит прибор.
Измерение
- Подсоедините прибор к источнику питания;
- Включите прибор с помощью кнопки "ON-OFF" на передней панели;
- С помощью кнопки "CHOICE OF CALIBRATION" выберите нужный Вам режим измерения "STANDARD" или "USER";
- Вставьте пробирку с бактериальной суспензией, которую хотите измерить и считайте значение на дисплее;
- Прибор выключите с помощью кнопки "ON-OFF" на передней панели.
Предупреждение: минимальный объем суспензии для измерения в поставляемых пробирках составляет 2 мл. Конструкция прибора позволяет использовать пробирки только с круглым дном.
Стандарт мутности по McFarland
Стандарт мутности по McFarland (сульфат бария) используется при приготовлении бактериальной суспензии определенной мутности.
Приготовление стандарта мутности по McFarland (McF):
- приготовьте растворы:
- BaCl2 x 2H2O ― 1%;
- H2SO4 ― 1%;
- приготовьте пробирки с диаметром одинаковым с пробирками, которые используются для приготовления бактериальных суспензий;
- добавьте обозначенные в таблице 1 растворы в указанных количествах для получения общего объема 10 мл, осадок BaSO4 при встряхивании создает необходимую мутность для оценки бактериальных суспензий;
- тщательно закройте пробирки.
Стабильность стандарта McF (сульфат бария) ― 6 месяцев при хранении в темном месте.
Перед приготовлением бактериальной суспензии тщательно встряхните пробирки со стандартом McF для создания гомогенной мутности. Сравните визуально мутность бактериальной суспензии с мутностью предполагаемой пробирки стандарта McF (или ближайших по мутности пробирок, т.е. для приготовления бактериальной суспензии 6х108 микробных тел/мл, сравните их с пробирками McF номер 1, 2, 3 и т.д.).
Таблица
| Номер по шкале McF | Приблизительное количество Мт/мл | BaCl2 (мл) | H2SO4 (мл) |
| 0,5 | 1х108/мл | 0,05 | 9,95 |
| 1 | 3х108/мл | 0,1 | 9,9 |
| 2 | 6х108/мл | 0,2 | 9,8 |
| 3 | 9х108/мл | 0,3 | 9,7 |
| 4 | 12х108/мл | 0,4 | 9,6 |
| 5 | 15х108/мл | 0,5 | 9,5 |
| 6 | 18х108/мл | 0,6 | 9,4 |
| 7 | 21х108/мл | 0,7 | 9,3 |
| 8 | 24х108/мл | 0,8 | 9,2 |
| 9 | 27х108/мл | 0,9 | 9,1 |
| 10 | 30х108/мл | 1,0 | 9,0 |
